Kolonnu hromatogrāfija ir plaši izmantota ķīmisko savienojumu maisījumu atdalīšanas un attīrīšanas metode. Kolonnu hromatogrāfijas instrumenti ietver vairākus galvenos komponentus, kas nodrošina efektīvu atdalīšanu. Šeit ir instrumenta pārskats:
1. Kolonna
Materiāls:Parasti izgatavots no stikla, nerūsējošā tērauda vai plastmasas.
Izmērs:Atšķiras atkarībā no hromatogrāfijas mēroga (analītiskā, preparatīvā vai rūpnieciskā).
Iepakots ar:Stacionārā fāze (piemēram, silikagels, alumīnija oksīds vai sveķi).
Frite vai filtrs:Neļauj stacionārajai fāzei iziet no kolonnas kopā ar mobilo fāzi.
2. Stacionārā fāze
Sastāvs:Ciets materiāls ar īpašām adsorbcijas īpašībām.
Veidi:Silikagels, alumīnija oksīds vai funkcionalizēti sveķi (piemēram, jonu apmaiņas vai afinitātes materiāli).
3. Mobilā fāze
Šķīdinātājs vai šķīdinātāju maisījums:Iznes paraugu cauri stacionārajai fāzei.
Veidi:Nepolārs (piemēram, heksāns), polārs (piemēram, metanols, ūdens) vai polaritātes gradients.
4. Paraugu inžektors
Izmanto parauga maisījuma ievadīšanai kolonnā.
Var būt manuāla iesmidzināšana vai automatizēta sistēma precīzai kontrolei.
5. Sūknis (pēc izvēles)
Nodrošina vienmērīgu mobilās fāzes plūsmu.
Izmanto augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijā (HPLC) vai gadījumos, kad nepieciešama precīza plūsmas kontrole.
6. Detektors (pēc izvēles)
Identificē un kvantitatīvi nosaka atdalītās sastāvdaļas reāllaikā, kad tās eluē no kolonnas.
Piemēri:
UV-Vis spektrofotometrs
Fluorescences detektors
Masas spektrometrs (MS)
Refrakcijas indeksa (RI) detektors
7. Frakciju savācējs
Savāc atdalītās savienojumu frakcijas, kad tās eluē no kolonnas.
Var ietvert automātisku savākšanu, pamatojoties uz laiku vai detektora signālu.
8. Datu iegūšanas sistēma (pēc izvēles)
Ieraksta un analizē datus no detektora.
Ģenerē hromatogrammas, kas parāda atdalīšanas procesu.
9. Aksesuāri
Spiediena regulatori:Novērst pārmērīgu spiedienu.
Termostati vai sildītāji:Ja nepieciešams, kontrolējiet kolonnas temperatūru.
Vārsti:Pārvaldiet kustīgās fāzes un parauga plūsmu.
Vienkāršākiem uzstādījumiem (piemēram, uz gravitācijas bāzes kolonnu hromatogrāfiju) sūkņi, detektori un automatizētas sistēmas var nebūt nepieciešami. Tā vietā gravitācijas vai zema spiediena sistēmas virza mobilo fāzi cauri stacionārajai fāzei.