Kolonnu hromatogrāfijas pamatprincips ir maisījumu atdalīšana, pamatojoties uz atšķirībām komponentu afinitātē pret stacionāro fāzi un kustīgo fāzi. Tas ietver šķidruma vai gāzes (kustīgās fāzes) izvadīšanu caur kolonnu, kas pildīta ar cietu materiālu (stacionāro fāzi), kur dažādas maisījuma sastāvdaļas pārvietojas ar atšķirīgu ātrumu, ņemot vērā to atšķirīgo mijiedarbību ar stacionāro fāzi.
Lūk, kā tas darbojas sīkāk:
Stacionārā fāze: kolonna ir pildīta ar cietu materiālu, piemēram, silikagelu vai alumīnija oksīdu, kas nodrošina virsmu maisījuma komponentu mijiedarbībai. Stacionārā fāze var būt polāra vai nepolāra atkarībā no atdalīšanas veida.
Mobilā fāze: šķīdinātājs vai šķīdinātāju maisījums, kas pārvietojas pa kolonnu. Mobilā fāze iznes maisījuma sastāvdaļas cauri stacionārajai fāzei.
Atdalīšana: Kad maisījums tiek uzklāts uz kolonnas augšpuses, tā sastāvdaļas dažādos apmēros mijiedarbojas ar stacionāro fāzi. Dažiem komponentiem var būt spēcīga pievilcība stacionārajai fāzei (adsorbcija), savukārt citiem var būt vājāka mijiedarbība un tie var ātrāk pārvietoties pa kolonnu.
Elucija: mobilajai fāzei pārvietojoties pa kolonnu, maisījuma sastāvdaļas tiek atdalītas, pamatojoties uz to atšķirīgo afinitāti pret stacionāro fāzi. Komponenti ar vājāku mijiedarbību ar stacionāro fāzi pārvietojas ātrāk, savukārt tie, kuriem ir spēcīgāka mijiedarbība, pārvietojas lēnāk.
Kolekcija: atdalītās sastāvdaļas iziet no kolonnas dažādos laikos, un tās var savākt atsevišķi.
Kolonnu hromatogrāfiju plaši izmanto ķīmijā savienojumu attīrīšanai un maisījumu atdalīšanai.